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适用于本科教学的新酶促反应动力学实验研究
作者: 吴梅芬 ; 王晓岗 ; 刘亚菲 ; 许新华
关键词: 酶催化 复杂反应 化学反应动力学 实验教学
摘要:通过严格的化学反应动力学推导,得到了a-糜蛋白酶催化三甲基乙酸对硝基苯酯水解反应相关的动力学参数的表达式,包括表观米氏常数 KM、酶-底物络合物稳定常数 K 、催化速率常数 kcat 、以及基元反应步骤速率常 k2和 k3等.实验在25℃,pH =8.5的三羟基氨基甲烷缓冲液中进行,用分光光度法测定反应的动力学曲线.数据经过非线性拟合和线性拟合,得到相关的动力学参数,该参数与理论预测一致.该实验酶制剂价格低廉,活性稳定,实验方法简单,可作为本科物理化学实验课程中复杂反应动力学测量的一个很好的实例,加深学生对化学反应动力学相关理论和概念的理解和掌握.