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抑癌基因PTEN载体构建及在LOVO细胞中的表达
作者: 徐宁 ; 李曼 ; 黎小琼 ; 赵学芹 ; 何敏 ; 黄宪章 ; 庄俊华
关键词: PTEN 表达载体 LOVO细胞株 转染
摘要:目的:构建抑癌基因PTEN的表达载体并在LOVO细胞中表达。方法:从人外周血中提取总RNA,通过RT-PCR扩增出PTEN基因片段,将PTEN基因连入pLenti6/V5载体。测序鉴定后,经脂质体转染入LOVO细胞,对细胞株进行RT-PCR和Western blot检测。结果:DNA测序证实pLenti6/V5-PTEN表达载体为阳性克隆;该表达载体转染LOVO细胞后上调了PTEN mRNA和蛋白的表达。结论:成功构建了pLen-ti6/V5-PTEN表达载体,为进一步研究PTEN在LOVO细胞中的功能奠定了基础。
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