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优化的蔗糖密度梯度离心法分离完整叶绿体
作者: 张年辉
关键词: 完整叶绿体 密度梯度离心 不连续蔗糖梯度 本科生实验
摘要:建立了一种简单、低成本的分离完整叶绿体的方法。以家用食品料理机破碎植物细胞,采用两层不连续蔗糖梯度和使用较低的离心速度等措施降低了实验成本和对设备的要求;通过采取措施防止叶绿体粗提物制备过程中叶绿体外被膜的破裂,以及在梯度制备和随后离心过程中由于颗粒扩散而导致的梯度不稳定,从而使方法具有很好的重复性。用该方法分离的完整叶绿体完整性很高(〉90%),可以用于叶绿体细胞生物学、生物化学与分子生物学等多方面的研究。